Čo sú mikróby?
Sú to výnimočne malé živé bytosti, ktoré je možné vidieť iba cez výkonný mikroskop – keďže ich nie je možné vidieť voľným okom. Mikróby sú prítomné vo vzduchu, pôde, vode a našom tele. Vo vnútri a zvonku nášho tela sú milióny týchto drobných častíc.
Niekoľko mikróbov je škodlivých, pričom väčšina z nich je dôležitá pre naše celkové zdravie. Pri ďalšom vysvetlení môžeme povedať, že dobré a niekoľko zlých mikróbov žije v našom tele spolu a pri zabíjaní tých škodlivých trpí aj veľká populácia zdravých mikróbov.
Aké sú typy mikróbov?
Mikróby majú rôzne formy života, pretože majú výrazne odlišné vlastnosti a vzhľad.
Bežné typy mikróbov sú:
– Vírusy
– Protist
– Huby
– Archaea
– Baktérie
Naše telo je domovom takmer všetkých vyššie uvedených kategórií.
Čo robia škodlivé mikróby?
Percento škodlivých mikróbov je pomerne nízke a predpokladá sa, že existuje iba 1 % škodlivých baktérií, ktoré môžu napadnúť náš systém a spôsobiť nám ochorenie. Infekčné choroby spôsobené mikróbmi sú osýpky a chrípka, pričom môžu prispievať k neinfekčným chorobám, ako sú: ischemická choroba srdca alebo nejaká forma rakoviny. Mikróby, ktoré môžu spôsobiť akýkoľvek typ ochorenia, sú známe ako patogény.
Ako účinkujú mikróby?
Patogén je mikroorganizmus, ktorý nesie potenciál spôsobiť akýkoľvek druh ochorenia. Infekcia je spôsobená rýchlym nástupom a proliferáciou patogénnych mikróbov u každého jednotlivca. Ochorenie sa stáva prominentným, keď zodpovedná infekcia vedie k akémukoľvek poškodeniu vitálneho systému alebo funkcií. Infekcia nemusí vždy viesť k chorobe.
Ako nás ovplyvňujú mikróby?
Mikróby vstupujú do nášho tela a spôsobujú infekciu. Do nášho systému môžu vstúpiť prostredníctvom nasledujúcich stránok:
– Prostredníctvom akéhokoľvek druhu zlomov na povrchu kože (napríklad Clostridium tetani, ktoré vedú k tetanu)
– Cez urogenitálny trakt (napríklad Escherichia coli, ktorá vedie k cystitíde)
– Cez gastrointestinálny trakt (ústna dutina) (napríklad Vibrio cholera, ktorá vedie k cholere)
– Cez dýchacie cesty (nos alebo ústa) (napríklad vírus chrípky, ktorý vedie k chrípke)
Mikróby po vstupe do tela dosiahnu cieľové miesto a prichytia sa k nemu, aby mohla začať infekcia. Potom sa začnú veľmi rýchlo množiť a absorbovať živiny z hostiteľa (naše telo). Je zaujímavé povedať, že sa vyhýbajú útokom imunitného systému hostiteľa a prežijú ich.
Ako sa liečia škodlivé mikróby?
Škodlivý mikrób môže spôsobiť veľa škody, ak sa s ním nezaobchádza včas. Dôvodom je, že sa veľmi rýchlo množia a v krátkom čase môžu infikovať veľkú oblasť. Preto sa ľuďom trpiacim rôznymi druhmi škodlivých mikróbov predpisujú silné lieky, ako sú antibiotiká.
Ale každý liek má svoje vedľajšie účinky a jedným z nich je, že; spolu so škodlivými mikróbmi poškodzujú aj dobré alebo nevyhnutné baktérie. To môže ovplyvniť silu prirodzeného imunitného systému tela bojovať proti vonkajším škodlivým mikróbom.
Z tohto dôvodu je dôležité vyvinúť prirodzené terapeutické činidlo, ktoré sa dokáže zamerať iba na škodlivé mikróby a chrániť užitočné baktérie. Včelí jed je jedným z najlepších terapeutických činidiel, ktoré, ak sa používajú v správnej dávke a cykle, môžu účinne zabíjať škodlivé mikróby.
Včelí jed (Apis Mellifera) účinná alternatíva gentamicínu pre špecifické kmene baktérií
Melittín je jednou z najdôležitejších zložiek včelieho jedu a je určite aktívnejší proti grampozitívnym baktériám ako gramnegatívnym baktériám. Rôzne klinické štúdie preukázali, že včelí jed má viacero účinkov, ako sú protizápalové, antivírusové a antibakteriálne účinky na rôzne typy buniek. Okrem toho má osí jed aj antibakteriálne vlastnosti. Hlavným cieľom tejto štúdie bolo určiť antibakteriálne pôsobenie včelieho jedu proti grampozitívnym baktériám a gramnegatívnym bakteriálnym kmeňom.
Pre toto klinické skúšanie sa analyzoval antibakteriálny mechanizmus včelieho jedu proti 6-gramovým pozitívnym baktériám a gramnegatívnym baktériám, ktoré zahŕňali: Burkholderia pseudomallei a Burkholderia mallei, pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, salmonela Typhimurium a staphylococcus aureus. 3 koncentrácie surového včelieho jedu a antibiotických diskov (gentamicín), ako pozitívne kontroly, boli hodnotené prostredníctvom diskovej difúznej metódy.
Zistilo sa, že včelí jed má výrazný antibakteriálny účinok proti Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus a escherichia coli vo všetkých 3 testovaných koncentráciách. Zistilo sa tiež, že včelí jed nemal žiadny pozitívny účinok na zostávajúce typy baktérií pre žiadnu z 3 testovaných dávok.
Získané výsledky naznačujú, že včelí jed bráni rastu a prežitiu škodlivých bakteriálnych kmeňov. Včelí jed možno použiť ako doplnkové terapeutické antimikrobiálne činidlo proti rôznym patogénnym baktériám. Včeliemu jedu však chýbali esenciálne proteíny, ktoré sú dôležité na preukázanie antibakteriálnej aktivity pre niekoľko kmeňov. Dá sa tiež povedať, že včelí jed spúšťa správny molekulárny mechanizmus, ktorý vedie k antibakteriálnemu účinku na rôzne kmene škodlivých baktérií. Na pochopenie mechanizmu zodpovedného za generovanie tohto antibakteriálneho účinku sú potrebné ďalšie štúdie.
Zdroj: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5043086/
Antimikrobiálna aktivita včelieho jedu a melittínu proti Borrelia Burgdorferi
Úvod
Percento infekčných chorôb sa v posledných rokoch značne zvýšilo. Ale hlavným problémom je, že neexistuje žiadna riadna účinná liečba, dokonca ani v prítomnosti antibiotík, ktorá by dokázala kontrolovať tieto infekcie. Lymská borelióza, známa aj ako lymská borelióza, zasiahla rôzne časti Afriky, Európy a USA. Lymská borelióza je spôsobená škodlivými baktériami Borrelia burgdorferi, ktoré sa zvyčajne prenášajú prostredníctvom kliešťov jeleňov. Antibiotiká ako ceftriaxón, amoxicilín a doxycyklín sa zvyčajne predpisujú na odstránenie borélií ssp, ale nie sú také účinné a majú množstvo vedľajších účinkov.
Vzhľadom na limitujúci účinok rôznych antibiotík na boreliálne morfológie sa táto klinická štúdia uskutočnila s cieľom pozorovať antimikrobiálnu aktivitu včelieho jedu a melitínu proti Borrelia burgdorferi. Včelí jed sa získava z Apis mellifera a pre svoje pozitívne antimikrobiálne účinky sa používa už dlho. V tejto klinickej správe sa testovali rôzne formy Borrelia burgdorferi proti včelímu jedu a melittínu a účinky sa porovnávali s liečbou antibiotikami.
Na vyhodnotenie antimikrobiálnej aktivity včelieho jedu a melitínu sa použil test SYBR Green I/PI spolu s celkovým počítaním živých buniek pre perzistentné látky v stacionárnej fáze a log fáze. Pripojené biofilmy sa skúmali technikami farbenia LIVE/DEAD a kryštálovou fialovou. Na získanie lepšieho obrazu o antimikrobiálnych účinkoch melitínu a včelieho jedu na borélie boli použité metódy atómovej sily a fluorescenčnej mikroskopie.
Metóda
Kmeň Borrelia burgdorferi bol získaný z American Type Culture Collection. Napäté baktérie sa udržiavali pri veľmi nízkej pasáži izolátov v médiu Barbour Stoner Kelly H doplnenom 6 % králičím sérom bez antibiotík v sterilnom skle a inkubovali sa pri 33 stupňoch Celzia s 5 % C02.
Apis mellifera sa pripravila s použitím sterilného 1x fosfátového tlmivého fyziologického roztoku s hodnotou pH 7,4 na testovanie in vitro. Melittín extrahovaný z BV bol získaný od Sigma, USA a potom pripravený na testovanie podľa pokynov výrobcu. Použité antibiotiká boli Daptomycín, Cefoperazón a Doxycyklín, ktoré boli tiež získané od spoločnosti Sigma a spravované podľa pokynov výrobcu. Okrem toho sa antimikrobiálne činidlá podrobili sterilizácii pomocou 0,1 um filtračnej jednotky, rozdelili sa na alikvóty a potom sa skladovali pri teplote mínus 20 stupňov Celzia.
Účinnosť antimikrobiálnej liečby bola hodnotená na stacionárnej a logaritmickej fáze b. Burgdorferove spirochéty prostredníctvom metódy priameho počítania a testu SYBR Green I/PI. Experiment bol pripravený s 1:75 zoslabením antimikrobiálne vytvrdenej stacionárnej kultúry, ktorá bola umiestnená do média bez antimikrobiálneho činidla a potom inkubovaná počas jedného týždňa pri zachovaní štandardných kultivačných podmienok. Po inkubácii sa životaschopnosť skúmala pomocou metódy priameho počítania a testu SYBR Green I/PI.
Mikrobiálne činidlá boli skúmané na autofluorescenciu, pretože v minulosti boli v teste SYBR Green I/PI hlásené problémy súvisiace s detekciou autofluorescencie rôznych činidiel. Mikrobiálne sa umiestnili na 96-jamkovú doštičku a potom sa testovali v 100 ul média BSK-H prostredníctvom testu SYBR Green I/PI. Hodnota autofluorescencie sa potom odpočítala od experimentálnych hodnôt.
Účinnosť antimikrobiálnych činidiel na pripojených biofilmoch sa vypočítala po meraní biomasy pomocou kryštálového násilného farbenia po a pred antimikrobiálnou úpravou. Centrifugácia sa uskutočňovala pri 12 000 x g pri teplote miestnosti počas 5 minút. Keď sa toto ošetrenie skončilo, kultivačné médium sa odstránilo a pripojené biofilmy sa ošetrili 500 ul 1x PBS a potom sa zozbierali.
Štruktúra biofilmu Borrelia bola ďalej vizualizovaná po antimikrobiálnom ošetrení pomocou mikroskopie atómovej sily. Médium BSK-H bolo pred analýzou biofilmov oddelené. Skenovanie sa uskutočnilo prostredníctvom zobrazovania AFM v kontaktnom režime pomocou Nanosurf Easyscan 2 AFM s použitím sond SHOCONG. Neskôr boli snímky spracované pomocou softvéru Gwyddion.
Kvantitatívne výsledky sa skúmali s prihliadnutím na strednú hodnotu rôznych hodnôt získaných z antimikrobiálnej obrazovky a tiež sa vykonal t-test a vykreslil sa graf pomocou softvéru Microsoft Excel. Každý experiment bol nezávisle vykonaný 4-krát a každý experiment mal tri vzorky.
Výsledok
Podľa zistení vykonaných rôznymi klinickými technikami sa zistilo, že melittín a celý včelí jed majú významný vplyv na všetky morfologické formy Borrelia burgdorferi, pretože inhibujú obnovu perzistentných a spirochetálnych buniek, ako to bolo zrejmé z regeneračné kultúry skúmané v médiu bez antimikrobiálnych látok. Melittin a celý včelí jed tiež pomohli znížiť životaschopnosť a počet pripojených biofilmov, ktoré sú extrémne antibioticky odolným žánrom b. burgdorferi. Hodnota MIC v koncentrácii melitínu bola v úplnom súlade s predchádzajúcimi klinickými štúdiami, ktoré skúmali účinok melitínu na b. spirochéty a na iné gramnegatívne mikroorganizmy.
Zatiaľ čo porovnanie účinkov melittínu a včelieho jedu na borélie preukázalo niekoľko rozdielov. Rovnako ako ultraštruktúrne analýzy pomocou mikroskopie atómovej sily ukázali, že včelí jed bol účinnejší na veľkosť a morfológiu biofilmov ako na jeho udržateľnosť. To naznačuje, že reakcia biofilmov je trochu komplikovaná a vyžaduje si podrobnú štúdiu.
Rozdiel v úrovni účinnosti melittínu a včelieho jedu na b. Burgdorfer naznačuje, že v celom včelom jede sú prítomné ďalšie zložky, ktoré ovplyvňujú biofilmy borélií. Rovnaké zistenia boli pozorované v nedávnej klinickej štúdii, ktorá testovala extrakty stévie na b. burgdorferi. Zistilo sa, že celý extrakt z listov stévie bol účinný, zatiaľ čo jeho zložka steviozid nedosiahla rovnaký účinok.
Okrem toho antibiotiká, ktoré boli použité v tejto klinickej štúdii, nepreukázali žiadny alebo len malý účinok na pripojené typy biofilmu B. burgdorferi. Identické zistenia boli nájdené v predchádzajúcich klinických štúdiách na Staphylococcus aureus a pseudomonas aeruginous, ktoré ukázali, že rôzne antibiotiká nemôžu pomôcť eliminovať formu biofilmu v rôznych prípadoch a môžu zvýšiť jeho veľkosť. V tejto klinickej štúdii bol takmer rovnaký výsledok pozorovaný pre antibiotikum doxycyklín, ktorý vedie k definitívnemu zvýšeniu hmotnosti pripojenej hmoty biofilmu borélií.
Zdroj: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5745474/
Záver
Obe vyššie uvedené klinické štúdie naznačujú, že včelí jed alebo jeho zložky môžu pomôcť pri kontrole a odstraňovaní škodlivých mikróbov. Včelí jed je dokonca účinný aj na tie mikróby, ktoré sú vysoko odolné voči rôznym antibiotikám. Tieto štúdie poskytujú platformu pre lekárskych výskumníkov na použitie včelieho jedu na liečbu rôznych typov mikróbov. Sú však potrebné ďalšie štúdie, ktoré majú veľkú základňu vzoriek a zahŕňajú rôzne zložky včelieho jedu a včelieho jedu ako celku a rôzne antibiotiká. Antibiotikum, ak sa používa, musí byť relevantné pre typ mikróbu, ktorý sa skúma. V konečnom dôsledku uľahčí zdravotníkom odporučiť pacientom presnú dávku a frekvenciu včelieho jedu, ktorý sa môže ľahko zbaviť škodlivých mikróbov.